光學(xué)測量顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器,已有300多年的發(fā)展史。自從有了顯微鏡,人們看到了過(guò)去看不到的許多微小生物和構成生物的基本單元——細胞。不僅有能放大千余倍的光學(xué)顯微鏡,而且有放大幾十萬(wàn)倍的電子顯微鏡,使我們對生物體的生命活動(dòng)規律有了更進(jìn)一步的認識。在普通中學(xué)生物教學(xué)大綱中規定的實(shí)驗中,大部分要通過(guò)顯微鏡來(lái)完成,因此,顯微鏡性能的好壞是做好觀(guān)察實(shí)驗的關(guān)鍵。
光學(xué)測量顯微鏡是利用凸透鏡的放大成像原理,將人眼不能分辨的微小物體放大到人眼能分辨的尺寸,其主要是增大近處微小物體對眼睛的張角(視角大的物體在視網(wǎng)膜上成像大),用角放大率M表示它們的放大本領(lǐng)。因同一件物體對眼睛的張角與物體離眼睛的距離有關(guān),所以一般規定像離眼睛距離為25厘米(明視距離)處的放大率為儀器的放大率。顯微鏡觀(guān)察物體時(shí)通常視角甚小,因此視角之比可用其正切之比代替。
光學(xué)測量顯微鏡使用方法
1.使用單筒顯微鏡時(shí),要養成用左眼觀(guān)察的習慣(因一般用右手畫(huà)圖),觀(guān)察時(shí)要兩眼同時(shí)睜開(kāi),不要睜一只閉一只,因為這樣易于疲勞。為了訓練學(xué)生習慣于兩眼同時(shí)睜開(kāi)觀(guān)察,可剪一塊長(cháng)約14cm,寬約6cm的長(cháng)方形硬紙片,在靠近左端處挖一個(gè)直徑比鏡筒上端外徑略小的圓孔,把圓孔套在鏡筒上段,觀(guān)察時(shí)兩眼同時(shí)睜開(kāi),利用紙片的右端擋住右眼的視線(xiàn),這樣訓練一段時(shí)間后,就能習慣于兩眼同時(shí)睜開(kāi),然后把紙片去掉。
2.直筒顯微鏡的鏡臂與鏡座連接處,是一個(gè)機械關(guān)節,可用于調節鏡筒的傾斜度,便于觀(guān)察,鏡臂不能過(guò)于后傾,一般不超過(guò)40°。但是在使用臨時(shí)裝片觀(guān)察時(shí),禁止使用傾斜關(guān)節(當鏡筒傾斜時(shí),載物臺也隨之傾斜,載玻片上的液體易流出),尤其是裝片內含酸性試劑時(shí)嚴禁使用,以免污損鏡體。
3.目鏡和物鏡的使用
一般都是用一個(gè)放大倍數適中的目鏡(10×)和低倍的物鏡開(kāi)始觀(guān)察,逐步改用倍數較高的物鏡,從中找到符合實(shí)驗要求的放大倍數。
轉換物鏡時(shí),先用低倍鏡觀(guān)察,調節到正確的工作距離(成像清晰)。如果進(jìn)一步使用高倍物鏡觀(guān)察,應在轉換高倍物鏡之前,把物像中需要放大觀(guān)察的部分移至視野中央(將低倍物鏡轉換成高倍物鏡觀(guān)察時(shí),視野中的物像范圍縮小了很多)。低倍物鏡和高倍物鏡基本齊焦(同高調焦)。
通常認為,使用任何一個(gè)物鏡時(shí),有效放大倍數的上限是1,000乘它的數值孔徑,下限是250乘它的數值孔徑。如40×物鏡的數值孔徑是0.65,則上、下限分別為:1000×0.65=650倍和250×0.65≈163倍,超過(guò)有效放大倍數上限的叫做無(wú)效放大,不能提高觀(guān)察效果。低于下限的放大倍數則人眼無(wú)法分辨,不利于觀(guān)察。一般實(shí)用的放大倍數范圍是500—700乘數值孔徑之間的數字。
4.油浸物鏡的使用
使用油浸物鏡時(shí),一般不要使用同高調焦。同高調焦只適用于每臺顯微鏡的原配物鏡,在使用低倍和高倍物鏡時(shí),是一個(gè)極有利的方便條件,但在使用油浸物鏡時(shí),則受到一定限制,一般地說(shuō),用油鏡觀(guān)察未加蓋玻片的標本片(載玻片)時(shí),利用同高調焦的安全度較大,而對于有蓋玻片的標本片,要小心使用,因為油浸物鏡的工作距離很短,在設計和裝配時(shí)所考慮的同高是對標準厚度蓋玻片的。